用KOD FX对小鼠滤纸血进行PCR分析  | 

【样品】
小鼠血液
【前处理】

【目的片段】
CIITA   450 bp
【引物】
均为21mer
【反应液组成】
dH2O  | 11 <μl>  | 
2x PCR Buffer for KOD FX  | 25  | 
2mM dNTPs  | 10 (0.4mM)  | 
10 pmol/μl Primer F  | 1.5  | 
10 pmol/μl Primer R  | 1.5  | 
KOD FX (1U/μl)  | 1  | 
Total  | 50 μl  | 
【PCR 循环】
94˚C (2 min)
↓
98℃ (10 sec.), 60˚C (30 sec.), 72˚C (40 sec.)  × 30 cycles
↓
72℃ (7 min.)
【数据提供】
名古屋市立大学医学研究科细胞分子生物
金泽智 老师
【来自老师的评语】
使用KOD FX即便在很短的时间内也能高效率地检测出转基因。此外,positive control(lane4,9)及negative control(lane5,10)的检测灵敏度都很好,没有出现false posi。以后,在管理转基因小鼠检测转基因时仍然会用KOD FX。